实验报告参考（通用30篇）

　　二.实验原理

　　用于免疫酶技术的酶有很多，如过氧化物酶，碱性磷酸酯酶，β－D－半乳糖苷酶，葡萄糖氧化酶，碳酸酐酶，乙酰胆碱酯酶，6－磷酸葡萄糖脱氧酶等。常用于ELISA法的酶有辣根过氧化物酶，碱性磷酸酯酶等，其中尤以辣根过氧化物酶为多。由于酶摧化的是氧化还原反应，在呈色后须立刻测定，否则空气中的氧化作用使颜色加深，无法准确地定量。

　　辣根过氧化物酶（HRP）是一种糖蛋白，每个分子含有一个氯化血红素（protonhemin）区作辅基。酶的浓度和纯度常以辅基的含量表示。氯化血红素辅基的最大吸收峰是403nm，HRP酶蛋白的最大吸收峰是275nm，所以酶的浓度和纯度计算式是（已知HRP的A（1cm 403nm 1%）＝25，式中1％指HRP百分浓度为100ml含酶蛋白1g，即10mg/ml，所以，酶浓度以 mg/ml 计算是HRP的A（1cm 403nm mg/ml=2.5）HRP纯度（RZ）=A403nm/A275nm纯度RZ（Reinheit Zahl）值越大说明酶内所含杂质越少。高纯度HRP的RZ值在3.0左右，最高可达3.4。用于ELISA检测的HRP的RZ值要求在3.0以上。

　　ELISA的基本原理有三条：

　　（1）抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫学活性；

　　（2）抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性；

　　（3）酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。

　　ELISA法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查，而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此，也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大，可概括四个方面：

　　1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。

　　2、研究抗酶抗体的合成。

　　3、显现微量的免疫沉淀反应。

　　4、定量检测体液中抗原或抗体成份。

　　基本方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:

　　1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。

　　2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。

　　3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。

　　4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。

　　5. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

　　6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O·D值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔O·D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

　　基本方法二 用于检测未知抗体的间接法：

　　用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。 ↓

　　加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。（同时做空白、阴性及阳性孔对照） ↓

　　于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,最后一遍用DDW洗涤。 ↓

　　其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。

　　（二） 酶与底物

　　酶结合物是酶与抗体或抗原, 半抗原在交联剂作用下联结的产物。是ELISA成败的关键试剂，它不仅具有抗体抗原特异的免疫反应，还具有酶促反应，显示出生物放大作用，但不同的酶选用不同的底物。

　　免疫技术常用的酶及其底物

　　终止剂为2mol/L H2SO4

　　终止剂为2 mol/L柠檬酸， 不同的底物有不同的终止剂。

　　可催化下列反应： HRP+H2O2→复合物 复合物+AH2→过氧化物酶+H2O+A AH2 ——为无色底物, 供氢体； A—— 为有色产物。

　　（三） ELISA常用的四种方法

　　1.直接法测定抗原 将抗原吸附在载体表面；

　　加酶标抗体，形成抗原—抗体复合物； 加底物。底物的降解量＝抗原量。

　　2.间接法测定抗体

　　将抗原吸附于固相载体表面； 加抗体, 形成抗原-抗体复合物； 加酶标抗体；

　　加底物。 测定底物的降解量＝抗体量。

　　3.双抗体夹心法测定抗原

　　将抗原免疫第一种动物获得的抗体吸附于固相表面;加抗原，形成抗原-抗体复合物;

　　加抗原免疫第二种动物获得的抗体，形成抗体抗原抗体复合物;加酶标抗抗体（第二种动物抗体的抗体）; 加底物。底物的降解量＝抗原量。

　　4. 竞争法测定抗原

　　将抗体吸附在固相载体表面;

　　（1） 加入酶标抗原；

　　（2）,（3）加入酶标抗原和待测抗原；

　　加底物。对照孔与样品孔底物降解量的差＝未知抗原量。

实验报告参考 篇20

　　霉菌在适宜的环境条件下才能生活。环境中影响霉菌生活的因素分为非生物因素和生物因素。其中非生物因素主要包括水、温度、氧气、食物种类等；生长在同一块食物上的霉菌之间的相互影响则属于生物因素。在这个活动中我们主要探究温度对霉菌生活的影响。实验以课外活动形式，由学生在家庭完成。 【活动目标】

　　1.尝试通过探究活动解决问题的过程；

　　2.学习设计简单的表格用以记录活动中观察到的现象；

　　3.练习通过分析实验数据得出结论的过程，解释温度是否影响霉菌的生活。 【材料器具】

　　馒头2块(或面包)、干净的食品袋2个、冰箱。 【方法步骤】

　　1.提出问题：霉菌的生活受哪些非生物因素的影响呢2.尝试对问题做出合理的解释――作出假设。

　　你认为影响霉菌生活的是： 。3.设计实验方案进行研究

　　影响霉菌生活的非生物因素很多，每个实验通常只研究一个可变因素。本实验首先探究的可变因素是： 。（温度或湿度）

　　4.实施实验并记录

　　每天用放大镜仔细观察两组食品表面的变化，直至最初长出的霉菌变色。要坚持每天做好观察和记录：

　　注意：(1)你们可以用文字或绘图的方式记录实验现象，也可以配以照片。(2)记录应真实，并尽可能详细。

　　海阳中学20xx—20xx学年度第一学期七年级

　　(4)请用绘图或照片的方式展示两组实验的最终结果。

　　5.分析实验现象

　　检验预期与实验结果是否完全一致，如果存在差异，你们的解释是：

　　你们对最终实验结果的解释是：

　　实验中你们遇到了哪些困难你们是如何克服的

　　6.你们得出的结论是： 【讨论】

　　1.你们认为选用什么样的食品容易长出霉菌

　　2.你们的实验方法、实验结果和其他组的一致吗

　　【思考】

　　1.如果想要“探究不同食品对霉菌生活的影响”，你将如何设计实验进一步解决这一问题呢

　　2.你如何设计实验探究其他条件(如湿度、氧气等)对霉菌生活的影响

实验报告参考 篇21

　　班级：

　　姓名：学号：组员：指导教师：

　　实验日期：20xx年9月25日

　　1、实验目的

　　1.准确识读流程图。

　　2.能准确列出组装管线所需的工具和易耗品等领件清单并正确领取工具和易耗品。

　　3.能进行管线的拆除。4.能进行管道的组装。5.能进行管线的试压。

　　6.树立牢固的安全意识，能做到管路拆装过程中的安全规范。

　　2、实验工具清单

　　表2管件、阀门清单

　　3、实验步骤和内容

　　3.1管路拆卸

　　管路的拆卸的原则：先上后下、归类放好、合理分工、合作完成。拆卸时应从上到下的顺序开始操作，先拆支管后拆总管。由于拆卸的管件较多，因此拆下的零件、垫片、螺栓螺母统一标上标号，归来放置。同学之间操作时，必须要用合适的工具，用力适当。首先，我们按照上图对要拆卸的管道和管件进行了1-8号，根据先松后拆，先上到下的顺序对管路进行拆装，拆卸的管件小心轻放，拆卸由两位同学以对角线的方式同时拆卸螺栓螺母，再把拆卸下来的部件（密封垫片、螺栓、螺母、管段）放到相应的位置，每个法兰对应的螺栓和螺母对号放置，以免混用导致不配套，导致出现渗漏的现象。